Laporan Praktikum Mikrobiologi Terapan (Pengaruh antibiotik terhadap pertumbuhan bakteri salmonella thyposa)

LAPORAN PRAKTIKUM

“Pengaruh Antibiotik Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella Typhosa”

Disusun Oleh:

Nama                           : Syahrul Ahyar

Nim                              : 342012136

Kelas/ Semester       : D/ V (Lima)

Mata Kuliah               : Mikrobiologi Terapan

Dosen Pengasuh     : Susi Dewiyeti. S.Si.,M.Si

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Biologi

Universitas Muhammadiyah Palembang

2014

ABSTRAK

Syahrul Ahyar (2014). Pengaruh antibiotik terhadap pertumbuhan bakteri salmonella thyposa: Laporan Praktikum Mikrobiologi Terapan. Progrm studi Biologi, Universitas Muhammadiyah Palembang, Program Sarjana (S1). Dosen Pengasuh : Susi Dewiyeti S.Si.,M.Si.

Kata kunci: Bakteri Salmonella thyposa, antibiotik.

Tujuan praktikum: (1) Untuk mengetahui pengaruh antibiotik terhadap pertumbuhan  mikroba. (2) Untuk mengetahui zona hambat dan zona sensitivitas. Ruang lingkup dan batasan masalah: (1) Bakteri Salmonella thyposa. (2) Antibiotik yang dipakai adalah Amoxylin 500 g. (3) Paper disk yang digunakan adalah paper disk berukuran 6 mm. (4) Parameter yang diamati adalah apakah terdapat zona hambat pada antibiotic yang diujikan.  Kesimpulan hasil praktikum: (1) Percobaan antibiotik terhadap bakteri Salmonella typhosa menghasilkan zona hambat sebesar 7,5438 Cm2. Ini berarti antibiotik mempengaruhi pertumbuhan bakteri. (2) Paperdish yang akan digunakan harus direndam selama 15 menit agar cairan antibiotok benar- benar meresap dengan sempurna pada paper dish. (3) Pada saat membungkus cawan petri yang yg berisi media yang telah diinokulasi bakteri, harus dibalik karena bakteri yang ditanam pada media akan tumbuh dan melakukan metabolisme pada saat inkubasi, proses metabolisme ini akan menghasilkan uap air oleh karena itu cawan petri harus dibalik jika akan dimasukkan ke dalam inkubator, agar uap air yang berada di tutup cawan tidak mengenai media.

A.    Praktikum Ke        : III

B.    Judul                     : Pengaruh Antibiotik Terhadap Pertumbuhan Bakteri                         Salmonella Typhosa.

C.   Pendahuluan

1)    Latar Belakang

            Kehidupan semua makhluk hidup tergantung pada lingkungan sekitar, baik lingkungan biotik maupun abiotik. Demikiian pula kehidupan mikroorganisme, tergantung pula pada lingkungan sekitarnya. Mikroorganisme ini tidak dapat menguasai faktor-faktor luar sepenuhnya, sehingga hidupnya sama sekali tergantung pada keadaan sekelilingnya. Satu-satunya cara untuk mempertahankan hidupnya ialah menyesuaikan diri atau beradaptasi dengan lingkungannya. Penyesuaian diri dapat terjadi secara cepat serta bersifat sementara waktu akan tetapi dapat pula terjadi perubahan itu bersifat permanen sehingga mempengaruhi bentuk dan morfologi serta sifat-sifat fisiologi yang turun temurun. Bakteri dapat pula mempengaruhi pH medium tempat ia hidup, sehingga sangatlah perlu kita ketahui sehingga dilakukan percobaan ini.

2)    Tujuan

a)    Untuk mengetahui pengaruh antibiotik terhadap pertumbuhan  mikroba.

b)    Untuk mengetahui zona hambat dan zona sensitivitas

D.   Dasar Teori          

1.    Bakteri Salmonella thyposa

            Salmonella adalah suatu genus bacteria enterobakteria gram negatif berbentuk tongkat yang mengakibatkan penyakit paratifus, tifus, dan penyakit foodborne. Species-species salmonella bisa bergerak bebas dan menghasilkan hidrogen sulfide. Salmonella ini diberi nama oleh Daniel Edward Salmon, ahli patologi Amerika Serikat, meskipun sebenarnya rekannya Theobald Smith yang pertama kali menemukan bakteri ini pada tahun 1885 pada tubuh babi.
Salmonella merupakan kuman gram negatif, tidak berspora dan panjangnya bervariasi (Anonim, 2008).

            Kebanyakan species bergerak dengan flagel peritrih. Salmonella tumbuh cepat pada pembenihan biasa tetapi tidak meragikan sukrosa dan laktosa. Kuman ini merupakan asam dan beberapa gas dari glukosa dan manosa. Kuman ini bisa hidup dalam air yang dibekukan dengan masa yang lama. Salmonella resisten terhadap zat-zat kimia tertentu misalnya hijau brilian, natrium tetrationat, dan natrium dioksikholat. Senyawa ini menghambat kuman koliform dan karena itu bermanfaat untuk isolasi salmonella dari tinja (Anonim, 2008).

Klasifikasi Salmonella thyposa

-       Kingdom : BakteriaPhylum : Proteobakteria

-       Classis : Gamma proteobakteria

-       Ordo : Enterobakteriales

-       Familia : Enterobakteriakceae

-       Genus : Salmonella

-       Species : Salmonella thyposa

Gambar1. Bakteri Salmonella thyposa

(Sumber: Joe, 2014)

               Salmonella digolongkan ke dalam bakteri gram negatif sebab salmonella adalah jenis bakteri yang tidak dapat mempertahankan zat warna metil ungu pada metode pewarnaan gram. Bakteri gram positif akan mempertahankan warna ungu gelap setelah dicuci dengan alkohol, sementara gram negatif tidak. Pada uji pewarnaan gram, suatu pewarna penimbal ditambahkan setelah metal ungu, yang membuat semua gram negative menjadi berwarna merah/ merah muda. Pengujian ini berfungsi mengelompokkan kedua jenis bakteri ini berdasarkan perbedaan struktur dinding sel mereka. Banyak species bakteri gram negative bersifat patogen ( penyebab penyakit) yang berarti mereka berbahaya bagi organisme inang. Sifat patogen ini berkaitan dengan komponen tertentu pada dinding sel gram negative terutama lapisan lipopolisakarida atau dikenal sebagai endotoksin (Anonim: 2008).

2.    Antibiotik

Salah satu zat antibakteri yang banyak dipergunakan akhir-akhir ini adalah antibiotik. Antibiotik adalah senyawa kimia khas yang dihasilkan atau diturunkan oleh organisme hidup termasuk struktur analognya yang dibuat secara sintetik, yang dalam kadar rendah mampu menghambat proses penting dalam kehidupan satu spesies atau lebih mikroorganisme. Penggunaan antibiotik sebagai zat antibakteri juga mempunyai efek negatif seperti timbulnya resistensi bakteri terhadap aktivitas kerja obat (Anonim, 2012).

Antibiotika adalah segolongan senyawa, baik alami maupun sintetik, yang mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu proses biokimia di dalam organisme, khususnya dalam proses infeksi oleh bakteri. Penggunaan antibiotika khususnya berkaitan dengan pengobatan penyakit infeksi, meskipun dalam bioteknologi dan rekayasa genetika juga digunakan sebagai alat seleksi terhadap mutan atau transforman. Antibiotika bekerja seperti pestisida dengan menekan atau memutus satu mata rantai metabolisme, hanya saja targetnya adalah bakteri. Antibiotika berbeda dengan desinfektan karena cara kerjanya. Desinfektan membunuh kuman dengan menciptakan lingkungan yang tidak wajar bagi kuman untuk hidup (Anonim, 2012).

Tidak seperti perawatan infeksi sebelumnya, yang menggunakan racun seperti strychnine, antibiotika dijuluki "peluru ajaib": obat yang membidik penyakit tanpa melukai tuannya. Antibiotik tidak efektif menangani infeksi akibat virus, jamur, atau nonbakteri lainnya, dan setiap antibiotik sangat beragam keefektifannya dalam melawan berbagai jenis bakteri. Ada antibiotika yang membidik bakteri gram negatif atau gram positif, ada pula yang spektrumnya lebih luas. Keefektifannya juga bergantung pada lokasi infeksi dan kemampuan antibiotik mencapai lokasi tersebut. Antibiotika oral (yang dimakan) mudah digunakan bila efektif, dan antibiotika intravena (melalui infus) digunakan untuk kasus yang lebih serius. Antibiotika kadang kala dapat digunakan setempat, seperti tetes mata dan salep (Anonim, 2012).

Secara garis besar resistensi bakteri terhadap antibiotik melalui tiga mekanisme. Pertama, terjadi mutasi pada porin (lubang-lubang kecil) yang terdapat pada dinding luar bakteri. Porin ini merupakan suatu jalur bagi antibiotik untuk masuk dan secara efektif menghentikan pertumbuhan bakteri. Akibat mutasi yang terjadi pada porin, antibiotik tidak lagi dapat mencapai tempat kerjanya di dalam sel bakteri. Kedua, adanya inaktivasi antibiotik. Mekanisme ini mengakibatkan terjadinya resistensi terhadap antibiotik golongan aminoglikosida dan beta laktam karena bakteri mampu membuat enzim yang merusak kedua golongan antibiotik tersebut. Ketiga, terjadi pengubahan tempat ikatan antibiotik oleh bakteri sehingga antibiotik tidak mampu lagi untuk berikatan dengan bakteri sebagai upaya menghentikan pertumbuhan bakteri tersebut (Lola, 2010).

Menurut ( Pelczar dan Chan 2009: 511), antibiotik merupakan zat kimia yang dihasilkan oleh suatu mikroorganisme yang menghambat mikroorganisme lain. Antibiotik berfungsi sebagai zat kematrapeutik. Menurut ( Pelczar dan Chan 2009: 508), karena zat kematerapeutik merupakan zat kimia yang digunakan untuk mengobati penyakit menular (kemoterapi)  atau mencegah penyakit penyakit (kemoprofilaksis). Zat ini diperoleh dari mikroorganisme atau tumbuhan atau disintesis di dalam laboratorium kimia ( Pelczar dan Chan 2009: 514- 515).

suatu zat antibiotik kemoterapeutik  yang ideal hendaknya memiliki sifat-sifat sbb:

·         Harus memiliki kemampuan untuk merusak atau menghambat mikroorganisme patogen spesifik. Makin besar jumlah dan macam mikroorganisme yang dipengaruhi, makin baik. Antibiotik berspektrum luas efektif  terhadap banyak spesies.

·         Tidak mengakibatkan berkembangnya bentuk-bntuk resisten parasit.

·         Tidak menimbulkan efek sampingan yang tidak dikehendaki pada inang, seperti  reaksi alergis, kerusakan pada saraf, iritasi pada ginjal atau saluran gastroinestin.

·         Tidak melenyapkan flora mikroba normal pada inang. Gangguan terhadap flora normal mikroba dapat mengacaukan “keseimbangan alamiah”, sehingga memungkinkan mikroba yang biasanya nonpatogenik atau bentuk-bentuk patogenik yang semula dikendalikan oleh flora normal, untuk menimbulkan infeksi baru. Penggunaan antibiotic berspektrum luas untuk waktu lama misalnya,  dapat melenyapkan flora bakteri normal tetapi tidak melenyapkan Monilia (cendawan) dari saluran pencernaan. Dalam keadaan demikian Monilia dapat menimbulkan infeksi.

·         Harus dapat diberikan melalui mulut tanpa diinaktifkan oelh asam lambung, atau melalui suntikan (parenteral) tanpa terjadi pengikatan dengan protein darah.

·         Memiliki taraf kelarutan yang tinggi dalam zat alir tubuh.

·         Konsentrasi antibiotic di dalam jaringan atau darah harus dapat mencapai taraf cukup tinggi sehingga mampu menghambat  atau mematikan penyebab infeksi.

a.    Jenis- jenis Antibiotik

1.    Penisilin ( Penicillins )

Penisilin atau antibiotik beta-laktam yaitu kelas antibiotik yang mengakibatkan kerusakan dinding sel bakteri ketika bakteri tengah dalam reaksi reproduksi. Penisilin merupakan grup agen bakterisida yang terbagi dalam penisilin G, penisilin V, amoksisilin, tikarsilin, ampisilin, oksasilin, kloksasilin dan nafsilin. Antibiotik ini dipakai untuk menyembuhkan infeksi yang terkait dengan kulit, gigi, mata, telinga, saluran pernapasan, dan lain-lain. Beberapa orang mungkin akan mengalami alergi pada penisilin dengan keluhan ruam atau mungkin demam lantaran hipersensitivitas pada antibiotik. Kerapkali penisilin diberikan dalam kombinasi dengan beragam jenis antibiotik yang lain (Anisa.Mia, 2013).

2.    Sefalosporin ( Cephalosporins )

Sefalosporin, seperti halnya juga penisilin, bekerja dengan mengganggu pembentukan dinding pada sel bakteri selama reproduksi. Akan tetapi, antibiotik ini dapat menyembuhkan beragam infeksi bakteri yang tidak juga mampu diobati dengan penisilin, seperti meningitis, gonorrhea, dan lain-lain. Dalam masalah di mana orang peka terhadap penisilin, maka sefalosporin dapat diberikan menjadi alternatif. Akan tetapi, dalam banyak masalah, saat seorang alergi pada penisilin, maka besar kemungkinan dia akan alergi pada sefalosporin pula. Ruam, diare, kejang perut, dan demam merupakan efek samping dari antibiotik ini (Anisa. Mia, 2013).

3.    Aminoglikosida ( Aminoglycosides )

Jenis antibiotik ini menghalangi pembentukan protein bakteri. Sebab efektif dalam menghalangi produksi protein bakteri, aminoglikosida diberikan diantaranya untuk menyembuhkan tifus dan pneumonia. Walaupun efektif dalam menyembuhkan bakteri pemicu infeksi, terdapat resiko bakteri semakin tahan pada antibiotik ini. Aminoglikosida pula diberikan dalam kombinasi dengan penisilin atau sefalosporin. Aminoglikosida efisien mengatur dan menyembuhkan infeksi bakteri, akan tetapi punya potensi melemahkan ginjal dan fungsi hati (Anisa. Mia, 2013).

4.    Makrolida ( Macrolides )

Sama sesuai sebelumnya, antibiotik ini mengganggu pembentukan protein bakteri. Makrolida menghambat terjadinya biosintesis protein bakteri dan kebanyakan diberikan untuk menyembuhkan pasien yang benar-benar peka pada penisilin. Makrolida mempunyai spektrum lebih luas dibanding dengan penisilin dan dipakai untuk menyembuhkan infeksi saluran pernafasan, infeksi saluran lambung, dan lain-lain. Ketidaknyamanan pencernaan, mual, dan diare merupakan sebagian efek samping dari makrolida. Bukan hanya itu saja, wanita hamil dan menyusui tidak boleh konsumsi makrolida (Anisa. Mia, 2013).

5.    Sulfonamida ( Sulfonamides )

Obat ini efisien menyembuhkan infeksi ginjal, akan tetapi sayangnya mempunyai efek berbahaya pada ginjal. Untuk menghambat terjadinya pembentukan kristal obat, pasien perlu minum sejumlah besar air. Satu diantara obat sulfa yang paling kerap dipakai yakni gantrisin (Anisa. Mia, 2013).

6.    Fluoroquinolones

Fluoroquinolones adalah satu satunya kelas dari antibiotik yang dengan cara langsung dapat menghentikan sintesis DNA bakteri. Sebab mampu diserap dengan amat baik oleh tubuh, fluoroquinolones bisa diberikan dengan cara oral. Antibiotik ini di anggap relatif aman dan banyak dipakai untuk menyembuhkan infeksi saluran kemih dan saluran pernapasan. Akan tetapi, fluoroquinolones diduga memengaruhi perkembangan tulang. Itu karena, obat ini tidak juga direferensikan untuk wanita hamil atau mungkin juga anak-anak. Efek samping yang kerap timbul meliputi diare, mual, muntah dll (Anisa. Mia, 2013).

7.    Tetrasiklin ( tetracyclines ) dan polipeptida ( polypeptides )

Tetrasiklin merupakan antibiotik spektrum luas yang dipakai untuk menyembuhkan beragam infeksi seperti infeksi pada telinga tengah, saluran pernafasan, saluran kemih, dan lain-lain. Pasien dengan permasalahan hati perlu hati-hati ketika mengambil tetrasiklin sebab bisa memperburuk masalah. Polipeptida di anggap cukup beracun makanya difungsikan pada permukaan kulit saja. Saat disuntikkan ke dalam kulit, polipeptida dapat mengakibatkan efek samping seperti rusaknya ginjal dan saraf. itulah beberapa aspek yang patut kita ketahui berkaitan dengan masalah obat antibiotic (Anisa. Mia, 2013).

E.    Pelaksanaan Praktikum

1.    Waktu dan Tempat

·         Waktu      : Jum’at, 31 Oktober 2014

·         Tempat    :Laboratorium Biologi FKIP Universitas Muhammadiyah                  Palembang.

2.    Alat dan Bahan

a.    Alat:

-       petri                                                     - incubator

-       Termometer                                         - Jangka sorong

-       Penggaris                                             - Kertas label

-       Beaker glass                                         - Tabung reaksi

-       Pinset                                                    - Bunsen

-       Penggaris                                             - Jarum ose

-       Sprayer                                                - Autoclave

b.    Bahan :

-       Media NA                                            - Media PDA              

-       Kertas putih                                         - Biakan bakteri S. Thyphosa

-       Label                                                   - Spiritus                     

-       Alkohol 70%                                        - Tissue                      

-       Paper disk diameter 6 mm                 - Antibotik amoxylin 500 mg

3.    Cara kerja

·         Mengamati pengaruh  antibioti

-       Inokulasi bakteri keseluru bahan media NA (untuk khamir/ kapang: inokulasi khamir ke seluruh permukaan media PDA) dalam cawan petri secara aseptis.

-       Masukkan masing- masing bahan kimia kedalam beaker glass kira- kira 5 ml, kemudian rendam paper dish berdeameter 6 mm selama 15 menit kedalam bahan kimia tersebut.

-       Setelah 15 menit pape dish direndam kemudian letakkan paper dish tersebut secara aseptis diatas permukaan media NA yang sudah diinokulai bakteri.

-       Bungkus cawan petri secara terbalik dengan kertas putih, kemudian inkubasi selama 24 jam untuk bakteri pada suhu 37℃ dalam inkubator .

-       Setelah inkubasi 24 jam ukur diameter zona hambat yang terbentuk dengan jangka sorong.

-       Rumus : Luas Zona Sensitifitas = Luas Lingkaran I ( Besar ) – Luas Lingkaran II (Paper dish)

F.    Hasil dan Pembahasan

1)    Hasil Praktikum

      Data hasil praktikum Pengamatan Pengaruh Faktor Lingkungan terhadap Pertumbuhan bakteri Salmonella thyposa diperoleh data hasil pengamatan perlakuan bahan kimia, dapat dilihat pada tabel 1.

Tabel 1. Luas zona hambat yang terbentuk pada antibiotik

No	Bahan Kimia	Diameter Zona Hambat (Cm)				Luas Zona Hambat (Cm2 )
		Sisi 1	Sisi 2	Sisi 3	Sisi 4
1	Antibiotik	3	3,2	3,3	2,9	7,5438

(Sumber: Dokumentasi Pribadi)

2)    Pembahasan

            Salmonella typhosa apabila di inkubasi dengan bahan uji peletakan paper dish yng direndam antibiotik maka akan mempunyai zona hambat yang cukup besar dan juga mempunyai daerah bening. Ini disebabkan karena zat kimia antibiotik mempengaruhi pertumbuhan bakteri. Zona hambat yang terbentuk sebesar 7,5438 Cm².  Paper dish harus direndam selama 15 menit pada cairan antibiotik alasannya agar cairan antibiotic benar- benar meresap sempurna pada paper dish. Pada saat membungkus cawan petri yang yg berisi media yang telah diinokulasi bakteri, harus dibalik karena bakteri yang ditanam pada media akan tumbuh dan melakukan metabolisme pada saat inkubasi, proses metabolisme ini akan menghasilkan uap air oleh karena itu cawan petri harus dibalik jika akan dimasukkan ke dalam inkubator, agar uap air yang berada di tutup cawan tidak mengenai media.

KESIMPULAN

1.    Percobaan antibiotik terhadap bakteri Salmonella typhosa menghasilkan zona hambat sebesar 7,5438 Cm². Ini berarti antibiotik mempengaruhi pertumbuhan bakteri.

2.    Paperdish yang akan digunakan harus direndam selama 15 menit agar cairan antibiotok bena- benar meresap dengan sempurna pada paper dish.

3.    Pada saat membungkus cawan petri yang yg berisi media yang telah diinokulasi bakteri, harus dibalik karena bakteri yang ditanam pada media akan tumbuh dan melakukan metabolisme pada saat inkubasi, proses metabolisme ini akan menghasilkan uap air oleh karena itu cawan petri harus dibalik jika akan dimasukkan ke dalam inkubator, agar uap air yang berada di tutup cawan tidak mengenai media.

Laporan Praktikum Mikrobiologi Terapan ( Pengaruh bahan kimia terhadap pertumbuhan bakteri salmonella thyposa)

LAPORAN PRAKTIKUM

“Pengaruh Bahan Kimia Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella Typhosa”

Disusun Oleh:

Nama                           : Syahrul Ahyar

Nim                              : 342012136

Kelas/ Semester       : D/ V (Lima)

Mata Kuliah               : Mikrobiologi Terapan

Dosen Pengasuh     : Susi Dewiyeti. S.Si.,M.Si

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Biologi

Universitas Muhammadiyah Palembang

2014

ABSTRAK

Syahrul Ahyar (2014). Pengaruh bahan kimia terhadap pertumbuhan bakteri salmonella thyposa: Laporan Praktikum Mikrobiologi Terapan. Progrm studi Biologi, Universitas Muhammadiyah Palembang, Program Sarjana (S1). Dosen Pengasuh : Susi Dewiyeti S.Si.,M.Si.

Kata kunci: Bakteri Salmonella thyposa, antibiotik.

Tujuan praktikum: (1) Untuk mengetahui pengaruh bahan kimia ( zat anti mikroba) terhadap pertumbuhan  mikroba. (2) Untuk mengetahui zona hambat dan zona sensitivitas. Ruang lingkup dan batasan masalah: (1) Bakteri Salmonella thyposa. (2) Zat kimia (3) Sabun cair(detol) dan alkohol (4) Paper disk yang digunakan adalah paper disk berukuran 6 mm. (5) Parameter yang diamati adalah apakah terdapat zona hambat pada zat kimia yang diujikan. Hasil Praktikum: (1) Zona hambat pada zat kimia antimikroba alkohol sebesar 0,4258 Cm². (2). Zona hambat zat kimia antimikroba sabun cair Dettol sebesar  13,1958 Cm².

A.    Praktikum Ke        : II

B.    Judul                     : Pengaruh Bahan Kimia Anti Mikroba (zat kimia)                               Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella Typhosa.

C.   Pendahuluan

1.    Latar Belakang

            Aktivitas mikroorganisme dipengaruhi oleh lingkungan. Perubahan yang terjadi di dalam lingkungan dapat mengakibatkan perubahan sifat morfologi dan fisiologi mikroorganisme. Beberapa golongan bakteri sangat tahan terhadap perubahan lingkungan, sehingga dapat menyesuaikan diri dengan kondisi baru. Ada pula golongan mikroorganisme yang sama sekali peka terhadap perubahan lingkungan sehingga tidak dapat menyesuaikan diri. Faktor lingkungan penting artinya dalam usaha mengendalikan kegiatan mikroorganisme, baik untuk kepentingan proses ataupun pengendalian.

            Beberapa bahan kimia seperti senyawa fenol, alkohol, formalin, dan lain-lain diketahui dapat menghambat atau mematikan mikroorganisme. Berbagai substansi tersebut menunjukkan efek antimikrobialnya dalam berbagai cara dan terhadap berbagai mikrorganisme. Cara kerja zat-zat kimia dalam menghambat atau mematikan mikroorganisme itu berbeda-beda, beberapa diantaranya adalah mendenaturasi protein, merusak membran, mengganggu sintesis protein, menghambat pembentukan dinding sel, dan lain-lain.

2.    Tujuan

a.    Untuk mengetahui pengaruh bahan kimia ( zat anti mikroba dan antibiotik) terhadap pertumbuhan  mikroba.

b.    Untuk mengetahui zona hambat dan zona sensitivitas

D.   Dasar Teori           :

1)    Bakteri Salmonella thyposa

            Salmonella adalah suatu genus bacteria enterobakteria gram negatif berbentuk tongkat yang mengakibatkan penyakit paratifus, tifus, dan penyakit foodborne. Species-species salmonella bisa bergerak bebas dan menghasilkan hidrogen sulfide. Salmonella ini diberi nama oleh Daniel Edward Salmon, ahli patologi Amerika Serikat, meskipun sebenarnya rekannya Theobald Smith yang pertama kali menemukan bakteri ini pada tahun 1885 pada tubuh babi.
Salmonella merupakan kuman gram negatif, tidak berspora dan panjangnya bervariasi (Anonim, 2008).

               Kebanyakan species bergerak dengan flagel peritrih. Salmonella tumbuh cepat pada pembenihan biasa tetapi tidak meragikan sukrosa dan laktosa. Kuman ini merupakan asam dan beberapa gas dari glukosa dan manosa. Kuman ini bisa hidup dalam air yang dibekukan dengan masa yang lama. Salmonella resisten terhadap zat-zat kimia tertentu misalnya hijau brilian, natrium tetrationat, dan natrium dioksikholat. Senyawa ini menghambat kuman koliform dan karena itu bermanfaat untuk isolasi salmonella dari tinja (Anonim, 2008).

Klasifikasi Salmonella thyposa

-       Kingdom : BakteriaPhylum : Proteobakteria

-       Classis : Gamma proteobakteria

-       Ordo : Enterobakteriales

-       Familia : Enterobakteriakceae

-       Genus : Salmonella

-       Species : Salmonella thyposa

Gambar Bakteri Salmonella thyposa (Sumber: Joe, 2014)

               Salmonella digolongkan ke dalam bakteri gram negatif sebab salmonella adalah jenis bakteri yang tidak dapat mempertahankan zat warna metil ungu pada metode pewarnaan gram. Bakteri gram positif akan mempertahankan warna ungu gelap setelah dicuci dengan alkohol, sementara gram negatif tidak. Pada uji pewarnaan gram, suatu pewarna penimbal ditambahkan setelah metal ungu, yang membuat semua gram negative menjadi berwarna merah/ merah muda. Pengujian ini berfungsi mengelompokkan kedua jenis bakteri ini berdasarkan perbedaan struktur dinding sel mereka. Banyak species bakteri gram negative bersifat patogen ( penyebab penyakit) yang berarti mereka berbahaya bagi organisme inang. Sifat patogen ini berkaitan dengan komponen tertentu pada dinding sel gram negative terutama lapisan lipopolisakarida atau dikenal sebagai endotoksin (Anonim: 2008).

2)    Antibakteri

         Antibakteri adalah zat yang dapat mengganggu pertumbuhan atau bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu metabolisme mikroba yang merugikan. Mikroorganisme dapat menyebabkan bahaya karena kemampuan menginfeksi dan menimbulkan penyakit serta merusak bahan pangan. Antibakteri termasuk kedalam antimikroba yang digunakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri. Antibakteri hanya dapat digunakan jika mempunyai sifat tosik selektif, artinya dapat membunuh bakteri yang menyebabkan penyakit tetapi tidak beracun bagi penderitanya. Mekanisme kerja dari senyawa antibakteri diantaranya yaitu menghambat sintesis dinding sel, menghambat keutuhan permeabilitas dinding sel bakteri, menghambat kerja enzim, dan menghambat sintesis asam nukleat dan protein (Anonim, 2012).

         Langkah pertama kerja obat berupa pengikatan obat pada reseptor sel beberapa diantaranya adalah enzim transpeptida. Kemudian dilanjutkan dengan reaksi transpeptidase dan sintesis peptidoglikan terhambat. Mekanisme diakhiri dengan pembuangan atau penghentian aktivitas penghambat enzim autolisis pada dinding sel. Aktivitas senyawa antibakteri dipengaruhi oleh pH, suhu stabilitas senyawa tersebut, jumlah bakteri yang ada, lamanya inkubasi, dan aktivitas metabolisme bakteri (Anonim, 2012).

a)    Mekanisme kerja

Mekanisme kerja dari senyawa antibakteri diantaranya yaitu menghambat sintesis dinding sel, menghambat keutuhan permeabilitas dinding sel bakteri, menghambat kerjaenzim, dan menghambat sintesis asam nukleat dan protein

·         Penghambatan sintesis dinding sel bakter

Langkah pertama kerja obat berupa pengikatan obat pada reseptor sel (beberapa diantaranya adalah enzim transpeptida. Dilanjutkan dengan reaksi transpeptidase dan sintesis peptidoglikan terhambat. Mekanisme diakhiri dengan pembuangan atau penghentian aktivitas penghambat enzim autolisis pada dinding sel. Pada lingkungan yang isotonis lisis terjadi pada lingkungan yang jelas hipertonik, mikrob berubah menjadi protoplas atau sferoflas yang hanya tertutup oleh selaput sel yang rapuh, contoh antibakteri dengan mekanisme tersebut adalah penicilin, sefalosporin, vankomisin, basitrasin, sikloserin, dan ampisilin.

·         Penghambatan Keutuhan Permeabilitas Dinding Sel Bakteri

Sitoplasma semua sel hidup dibatasi oleh selaput sitoplasma yang bekerja sebagai penghalang dengan permeabilitas selektif, melakukan fugsi pengangkutan aktif sehingga dapat mengendalikan susunan sel.[butuh rujukan] Bila integritas fungsi selaput sitoplasma terganggu misalnya oleh zat bersifat surfaktan sehinga permeabilitas dinding sel berubah atau bahkan menjadi rusak, maka komponen penting, seperti protein, asam nukleat, nukleotida, dan lain-lain keluar dari sel dan sel berangsur-angsur mati. Amfoterisin B,kolistin, poimiksin, imidazol, dan polien menunjukkan mekanisme karja tersebut.

·         Penghambatan sintesis Protein Sel Bakteri

Senyawa penghambat ini akan menyebabkan Staphylococcus aureus salah membaca kode pada mRNA oleh tRNA. Kloramfenikol, eritromisin, linkomisin, tetrasiklin, dan aminoglikosida juga bersifat menghambat sintesis protein sel bakteri.

·         Penghambatan Sintesis Protein Sel Bakteri

Senyawa antibakteri yang bekerja dengan senyawa ini, diharapkan mempunyai selektifitas yang tinggi, sehingga hanya sintesis asam nukleat bakteri saja yang dihambat. Umumya senyawa penghambat akan berikatan dengan enzim atau salah satu komponen yang berperan dalam tahapan sintesis, sehingga akhirnya reaksi akan terhenti karena tidak ada substrat yang direaksikan dan asam nukleat tidak dapat terbentuk.

Berdasarkan aktivitasnya zat antibakteri dibedakan menjadi dua jenis, yaitu bakteriostatik dan bakteriosida

-       Bakteriostatik

Adalah zat antibakteri yang memiliki aktivitas menghambat pertumbuhan bakteri (menghambat perbanyakan populasi bakteri), namun tidak mematikan.

-       Bakterisida

Adalah zat antibakteri yang memiliki aktifitas membunuh bakteri.  Namun ada beberapa zat antibakteri yang bersifat bakteriostatik pada konsentrasi rendah dan bersifat bakterisida pada konsentrasi tinggi.

3)    Kelompok-kelompok utama bahan antimikrobial kimiawi

Menurut Pelczar dan Chan, (2009) berikut beberapa kelompok utama bahan antimikrobial kimiawi:

1. Persenyawaan fenolat

Fenol (asam karbolat), yang digunakan untuk pertama kalinya oleh Lister sekitar tahun 1860-an di dalam pekerjaannya untuk mengembangkan teknik-teknik pembedahan aseptik. Telah lama merupakan standar pembanding bagi disinfektan lain untuk mengevaluasi aktivitas bakterisidalnya (Pelczar dan Chan, 2009: 489).

2. Persenyawaan alkohol

Etil alkohol dengan konsentrasi 50-70% efektif terhadap mikroorganisme vegetatif atau yang tidak membentuk spora. Etil alkohol mempunyai aktivitas sporosidal yang rendah. Alkohol efektif untuk mengurangi flora mikrobe pada kulit dan untuk disinfektan termometer oral. Alkohol merupakan denaturasi protein, suatu sifat yang terutama memberikan aktivitas antimikrobial pada alkohol. Disamping itu alkohol juga merupakan pelarut lipid sehingga dapat pula merusak membran sel (Pelczar dan Chan, 2009: 490).

3. Halogen serta persenyawaannya

Keluarga halogen beranggotakan unsur-unsur flour, klor, brom dan iodium. Klor dan iodium ialah yang paling luas penggunaannya sebagai zat antimikrobial (Pelczar dan Chan, 2009: 492).

-       Iodium

Zat ini merupakan salah satu bahan germisidal yang paling tua serta paling efektif. Yitu efektif terhadap segala macam bakteri, spora, cendawan dan virus. Larutan iodium terutama digunakan untuk mendisinfeksi kulit, khususnya sebagai disinfektan kulit sebelum operasi (Pelczar dan Chan, 2009:492).

-       Klor dan persenyawaan.

Merupakan salah satu disinfektan paling luas penggunaannya. Tersedia banyak persenyawaan klor yang lebih mudah digunakan dengan baik, sama efektifnya sebagai disinfektan. Beberapa diantaranya adalah (Pelczar dan Chan, 2009: 492).

-       Hipoklorit.

Merupakan persenyawaan yang banyak digunakan baik untuk keperluan rumah tangga maupun industri. Persenyawaan- persenyawaan tersebut tersedia sebagai bubuk atau larutan cair dan dalam berbagai konsentrasi bergantung kepada penggunaan yang dianjurkan (Pelczar dan Chan, 2009: 492-493).

-       Kloramin.

Salah satu kegunaan keuntungan kloramin ialah jauh lebih stabil dari pada hipoklorit. Maksudnya, persenyawaan- persenyawaan tersebut melepaskan klor dalam wakturelatif lama (Pelczar dan Chan, 2009:493).

4. Logam berat dan persenyawaannya

Sebagian besar logam berat baik dalam bentuk unsur maupun persenyawaan bersifat merugikan bagi mikroorganisme. Yang paling efektif ialah merkuri, perak dan tembaga. 

-       Logam berat (aksi oligodinamik)

logam-logam tertentu dalam jumlah amat kecil, terutama perak, dapat mematikan bakteri hal ini disebut sebagiu aksi oligodinamik (oligodynamic action) (Pelczar dan Chan, 1988: 494).

-       Persenyawaan logam berat,

banyak sekali persenyawaan logam berat memiliki aktivitas germisidal atau antiseptik. Persenyawaan logam berat antimikrobial yang paling penting ialah persenyawaan yang mengandung merkuri, perak dan tembaga. Merkuri kloride yang dulu merupakann disinfektan populer kini tidak lagi digunakan, namun beberapa persenyawaan merkuri organik (Mertiolat, Merkurokrom dan Metafen) masih digunakan sebagai antiseptik. Perat nitrat telah lama digunakan untuk mencegah infeksi oleh gonokokus pada mata bayi yang baru lahir. Persenyawaan yang mengandung tembaga lebih banyak digunakan sebagai fungisida dalam bidang pertanian (Pelczar dan Chan, 1988: 495).

5. Detto Sabun Cair

Dettol memperoleh sifat antiseptik dari senyawa kimia aromatik yang dikenal sebagai chloroxylenol (C8H9ClO) yang terkandung dalam semua produk Dettol tetapi dalam jumlah yang bervariasi. Konsentrasi maksimum senyawa kimia ini hadir dalam cairan antiseptik Dettol yang juga berisi bahan-bahan lain seperti minyak pinus, minyak jarak dan karamel banyak yang tidak larut dalam air. Hal ini karena alasan ini bahwa ketika beberapa tetes cairan antiseptik Dettol ditambahkan ke air mandi mereka membentuk putih emulsi bukan melarutkan sepenuhnya. Alasan lain mengapa orang membeli Dettol adalah bahwa tidak hanya semua produk Dettol tidak beracun di alam tetapi relatif lebih murah dariproduk sejenis lainnya (Anonim, 2014).

6. Deterjen

Zat pengurang tegangan permukaan atau zat pembasah yang terutama digunakan untuk membersihkan permukaan benda disebut deterjen. Salah satu contohnya adalah sabun. Tetapi sabun tidak dapat bekerja dengan baik dalam air sadah. Karena itulah kini telah dikembangkan bahan pembersih baru yang lebih efisien yang disebut surfaktan atau deterjen sintesis. Zat tersebut tidak membentuk endapan dalam air alkalinmaupun asam, serta tidak bereaksi dengan mineral yang terdapat dalam air sadah dan membentuk endapan. Beberapa jenis sabun dan deterjen bersifat bakterisidal (Pelczar dan Chan, 2009: 495).

7. Aldehide

Glutaraldehide dan formaldehide merupakan dua persenyawaan aldehide yang mempunyai berbagai penerapan untuk mengendalikan populasi mikroorganisme.

-       Glutaraldehide

Persenyawaan ini merupakan dialdehide jenuh, Larutan glutaraldehide 2 % memperlihatkan aktivitas antimikrobial berpektrum luas. Efektif terhadap sel vegetatif bakteri, cendawan, serta virus. Digunakan unruk mensterilkan peralatan urologis (untuk pemeriksaan saluran kemih), alat-alat berlensa, dan perlengkapan medis lain. Tetapi untuk mencapai keadaan steril dibutuhkan waktu perlakuan yang lama (Pelczar dan Chan, 2009: 497).

-       Formaldehide

Persenyawaan ini berbentuk gas, yang stabil hanya pada konsentrasi tinggi dan suhu yang tinggi pula. Pada suhu kamar akan berpolimerisasi membentuk zat padat, Polimer yang penting,paraformaldehide, merupakan zat padat tak berwarna yang akan segera menghasilkan formaldehide bila dipanaskan Formaldehide juga diperdagangkan dalam bentuk larutan bernama formalin, yang mengandung 37 sampai 40% formaldehide . Formalin memiliki aktivitas antimikrobial yang sangat tinggi; uap formaldehide akan mensterilkan benda dalam ruang tertutup dan pada keadaan yang cocok. Ciri buruk formaldehide ialah menyebabkan iritasi pada kulit dan uapnya berbahaya (Pelczar dan Chan, 2009: 498).

Formalin adalah larutan formaldehida dalam air dengan kadar 36 – 40%, tidak berwarna dan baunya sangat menusuk dan biasanya ditambah methanol hingga 15% sebagai stabilisator. Di pasaran, formalin dapat diperoleh dalam bentuk sudah diencerkan, yaitu dengan kadar formaldehida 30, 20 dan 10%. Disamping dalam bentuk cairan, formalin dapat diperoleh dalam bentuk tablet yang masing-masing mempunyai berat 5 gram. Formaldehida pertama kali disintesis oleh kimiawan Rusia Aleksander Butlerov pada tahun 1859 namun diidentifikasi lebih lanjut oleh August Wilhelm von Hofmann pada tahun 1867. Formaldehida mudah larut dalam air sampai kadar 55%, sangat reaktif dalam suasana alkalis serta bersifat sebagai zat pereduksi kuat, mudah menguap karena titik didihnya yaitu -21°C (Ita. Apriani, 2012).

Formaldehid membunuh bakteri dengan membuat jaringan dalam bakteri dehidrasi (kekurangan air). unsur aldehida didalamnya bersifat mudah bereaksi dengan protein, karena ketika dimasukan ke media, formalin akan mengikat unsur protein mulai dari bagian permukaan hingga terus meresap ke bagian dalam. Protein yang telah rusak, tidak akan digunakan bakteri untuk bermetabolisme dan menghasilkan energi,sehingga tidak terjadi pertumbuhan bakteri kerena sumber nutrien untuk tumbuh telah dirusak oleh antibiotik formalin (Ita. Apriani, 2012).

8. Kemosterilisator gas.

Pada masa kini ada berbagai macam produk yang dibuat dari bahan yang tidak dapat disterilkan dengan suhu tinggi atau kemosterilisator cairan. Sterilisasi kimiawi dengan menggunakan gas merupakan cara yang efektif serta praktis untuk bahan-bahan semacam itu. Dalam proses ini, bahan itu dikenai gas di dalam suatu ruangan tertutup pada suhu kamar. Setelah perlakuan, gas tersebut dapat dengan mudah dikeluarkan atau dihilangkan. Bahan plastik yang peka terhadap panas, seperti alat suntik, tabung reaksi, cawan petri, dan pipet serta ruang tertutup dapat disterilkan dengan gas. Zat utama yang belakangan ini digunakan untuk sterilisasi dengan gas ialah etilenokside (Pelczar dan Chan, 2009: 499).

           Menurut ( Pelczar dan Chan, 2009: 453- 456), ada banyak faktor dan keadaan yang mempengaruhi kerja antimikrobial, yaitu sbb:

a.    Konsentrasi atau intesitas zat antimikrobial dimana jika semakin tinggi konsentrasi bahan kimia atau intensitas sarana fisik yang diberikan dalam suatu waktu tertentu, maka makin cepat sasaran (mikroorganisme) akan mati.

b.    Jumlah mikroorganisme dimana jika jumlah sel bakteri yang akan dibunuhnya banyak, maka akan memerlukan waktu yang lebih lama supaya sel tersebut dapat benar-benar mati.

c.    Suhu, dimana jika bertambahnya suhu dapat meningkatkan kecepatan terbunuhnya sel-sel bakteri.

d.    Spesies mikroorganisme, dimana pesies mikroorganisme menunjukkan kerentanan yang berbeda-beda terhadap sarana fisik dan bahan kimia. Telah kita ketahui bahwa pada spesies pembentuk spora, sel vegetatif yang sedang tumbuh lebih mudah dibunuh dibandingkan dengan sporanya. Sesungguhnya spora bakteri adalah yang paling resisten diantara semua organism hidup dalam hal kemampuan dalam bertahan hidup pada keadaa fisik dan kimiawi yang kurang baik.

e.    Adanya bahan organic, dimana adanya bahan organic asing dapat menurunkan dengan nyata keefektifan zat kimia antimokrobial dengan cara menginaktifkan bahan-bahan tersebut atau melindungi mikroorganisme dari padanya. Contohnya yaitu penggabungan disinfektan dengan bahan organic membentuk produk yang tidak bersifat mikrobisidial dan penggabungan disinfektan dengan bahan organik menghasilkan suatu endapan, sehingga disinfektan tidak mungkin lagi mengikat mikroorganisme.

f.     Keasaman atau kebasaan (pH), dimana mikroorganisme yang terdapat pada bahan dengan pH asam dapat dibasmi pada suhu yang lebih rendah  dan dalam waktu yang lebih singkat dibandingkan dengan mikroorganisme yang sama di dalam lingkungan yang basa.

E.    Pelaksanaan Praktikum

1.    Waktu dan Tempat

-       Waktu      : Jum’at, 31 Oktober 2014

-       Tempat    :Laboratorium Biologi FKIP Universitas Muhammadiyah                  Palembang.

2.    Alat dan Bahan

a.    Alat:

-       petri                                                     - incubator

-       Termometer                                         - Jangka sorong

-       Penggaris                                             - Kertas label

-       Beaker glass                                         - Tabung reaksi

-       Pinset                                                    - Bunsen

-       Penggaris                                             - Jarum ose

-       Sprayer                                                - Autoclave

b.    Bahan :

-       Media NA                                            -  Alkohol 96 %

-       Media PDA                                         - Kertas putih

-       Biakan bakteri S. Thyphosa               - Label

-       Spiritus                                                - Alkohol 70%             

-       Tissue                                                  - Paper disk diameter 6 mm

-       Detol sabun cair                                  - Antibotik amoxylin 500 mg

3.    Cara kerja

a.    Mengamati pengaruh bahan kimia dan antibiotik

1)      Inokulasi bakteri keseluru bahan media NA (untuk khamir/ kapang: inokulasi khamir ke seluruh permukaan media PDA) dalam cawan petri secara aseptis.

2)      Masukkan masing- masing bahan kimia kedalam beaker glass kira- kira 5 ml, kemudian rendam paper dish berdeameter 6 mm selama 15 menit kedalam bahan kimia tersebut.

3)      Setelah 15 menit pape dish direndam kemudian letakkan paper dish tersebut secara aseptis diatas permukaan media NA yang sudah diinokulai bakteri.

4)      Bungkus cawan petri secara terbalik dengan kertas putih, kemudian inkubasi selama 24 jam untuk bakteri pada suhu 37℃ dalam inkubator .

5)      Setelah inkubasi 24 jam ukur diameter zona hambat yang terbentuk dengan jangka sorong.

6)      Rumus : Luas Zona Sensitifitas = Luas Lingkaran I ( Besar ) – Luas Lingkaran II (Paper dish)

F.    HASIL DAN PEMBAHASAN

1.    HASIL PRAKTIKUM

      Berdasarkan data hasil praktikum Pengamatan Pengaruh Faktor Lingkungan terhadap Pertumbuhan bakteri Salmonella thyposa diperoleh data hasil pengamatan perlakuan bahan kimia, dapat dilihat pada tabel 1.

 Tabel 1. Luas Zona Hambat yang Terbentuk Pada Zat Kimia Anti Mikroba            Terhadap Bakteri Salmonella thyposa

No	Bahan Kimia	Diameter Zona Hambat (Cm)				Luas Zona Hambat (Cm2 )
		Sisi 1	Sisi 2	Sisi 3	Sisi 4
1	Alkohol 90%	1	0,9	0,9	1	0,4258
2	Dettol sabun cair	4	4	4,2	4,2	13,1958

(Sumber: Dokumentasi Pribadi).

2.    Pembahasan

        Salmonella typhosa yang diinkubasi dengan bahan uji zat kimia antimikroba alkohol 90% menghasilkan zona hambat sebesar 0,4258 Cm². Sedangkan pada zat antimikroba Dettol sabun cair menghasilkan zona hambat sebesar 13,1958 Cm². Ini berarti sabun cair lebih efektif membunuh bakteri Salmonella typhosa disbanding alkohol 90%. .  Paper dish harus direndam selama 15 menit pada cairan antibiotik alasannya agar cairan antibiotic benar- benar meresap sempurna pada paper dish.

Pada saat membungkus cawan petri yang yg berisi media yang telah diinokulasi bakteri, harus dibalik karena bakteri yang ditanam pada media akan tumbuh dan melakukan metabolisme pada saat inkubasi, proses metabolisme ini akan menghasilkan uap air oleh karena itu cawan petri harus dibalik jika akan dimasukkan ke dalam inkubator, agar uap air yang berada di tutup cawan tidak mengenai media.

KESIMPULAN

1.    Pada zat kimia antimikroba alkohol 90% terbentuk zona hambat 0,4258 Cm² ini berarti alkohol 90% mempengarhi pertumbuhan bakteri Salmonella typhosa.

2.    Pada zat kimia antimikroba sabun cair Dettol juga terbentuk zona hambat  13,1958 Cm² ini berarti sabun cair juga mempengaruhi pertumbuhan bakteri Salmonella typhosa.

3.    Luas zona hambat pada sabun cair Dettol lebih besar dibandingkan dengan alkohol 90%.

4.    Meletakkan cawan petri yang berisi media yang telah diinokulasi harus dibalik karena bakteri merupakan makhluk hidup setiap makhluk hidup melakukan metabolism, proses metabolisme menghasilkan uap air, jadi agar uap air hasl metabolism tidak mengenai media yg diinokulasi nantinya maka cawan petri harus diletakkan dalam posisi terbalik